La peritonitis infecciosa felina (PIF) es una enfermedad mortal de los gatos que actualmente carece de vacunas o terapias antivirales autorizadas y asequibles. La enfermedad tiene un espectro de presentaciones clínicas que incluyen una forma efusiva (“húmeda”) y una forma no efusiva (“seca”), las cuales pueden complicarse por afectación neurológica u ocular. El biotipo del coronavirus felino (FCoV), denominado virus de la peritonitis infecciosa felina (FIPV), es el agente etiológico de la FIP. El objetivo de este estudio fue determinar y comparar las eficacias antivirales in vitro de los inhibidores de la proteasa viral GC376 y nirmatrelvir y los análogos de nucleósidos remdesivir (RDV), GS-441524, molnupiravir (MPV; EIDD-2801) y β-D- N4-hidroxicitidina (NHC; EIDD-1931). Estos agentes antivirales se evaluaron funcionalmente utilizando un sistema de bioensayo in vitro optimizado. Los antivirales se evaluaron como monoterapias contra los serotipos I y II del FIPV y como terapias anticoronavirales combinadas (CACT) contra el serotipo II del FIPV, lo que proporcionó evidencia de sinergia para combinaciones seleccionadas. También determinamos las propiedades farmacocinéticas de MPV, GS-441524 y RDV después de la administración oral a gatos in vivo, así como después de la administración intravenosa de RDV. Establecimos que MPV administrado por vía oral a 10 mg/kg, GS-441524 y RDV a 25 mg/kg, y RDV administrado por vía intravenosa a 7 mg/kg alcanza niveles plasmáticos superiores a los valores de CE50 correspondientes establecidos, que se mantienen durante 24 h para GS-441514 y RDV.