A peritonite infecciosa felina (PIF) é uma doença fatal em gatos que atualmente carece de vacinas licenciadas e acessíveis ou de terapêutica antiviral. A doença tem um espectro de apresentações clínicas, incluindo uma forma efusiva (“úmida”) e uma forma não efusiva (“seca”), ambas podendo ser complicadas por envolvimento neurológico ou ocular. O biótipo do coronavírus felino (FCoV), denominado vírus da peritonite infecciosa felina (FIPV), é o agente etiológico da PIF. O objetivo deste estudo foi determinar e comparar as eficácias antivirais in vitro dos inibidores de protease viral GC376 e nirmatrelvir e dos análogos de nucleosídeo remdesivir (RDV), GS-441524, molnupiravir (MPV; EIDD-2801) e β-D- N4-hidroxicitidina (NHC; EIDD-1931). Estes agentes antivirais foram avaliados funcionalmente utilizando um sistema de bioensaio in vitro otimizado. Os antivirais foram avaliados como monoterapias contra os sorotipos I e II do FIPV e como terapias anticoronavirais combinadas (CACT) contra o sorotipo II do FIPV, o que forneceu evidências de sinergia para combinações selecionadas. Também determinamos as propriedades farmacocinéticas do MPV, GS-441524 e RDV após administração oral a gatos in vivo, bem como após administração intravenosa de RDV. Estabelecemos que MPV administrado por via oral a 10 mg/kg, GS-441524 e RDV a 25 mg/kg, e RDV administrado por via intravenosa a 7 mg/kg atingem níveis plasmáticos superiores aos valores de EC50 correspondentes estabelecidos, que são mantidos durante 24 horas por GS-441514 e RDV.